Co to jest cytometria przepływowa?

Posted on
Autor: William Ramirez
Data Utworzenia: 22 Wrzesień 2021
Data Aktualizacji: 12 Listopad 2024
Anonim
Flow cytometry : basic principles | What the use of  flow cytometry ? | Cell sorting by FACS
Wideo: Flow cytometry : basic principles | What the use of flow cytometry ? | Cell sorting by FACS

Zawartość

Cytometria przepływowa nie jest testem na określoną chorobę lub stan. Zamiast tego cytometria przepływowa jest techniką, którą można wykorzystać do wielu różnych celów. Ciecz zawierająca komórki lub bakterie jest przesyłana przez bardzo wąską rurkę. Pozwala to na pomiar właściwości poszczególnych komórek za pomocą laserów lub innego rodzaju światła. W placówkach medycznych jest czasami używany do diagnostyki i leczenia raka. Może również służyć do sprawdzania stanu zdrowia pacjenta po przeszczepie narządu. To, co sprawia, że ​​cytometria przepływowa jest przydatną techniką, polega na tym, że można jej używać do oglądania dużej liczby komórek, jednej komórki na raz.

Aby lepiej zrozumieć, jak działa cytometria przepływowa, wyobraź sobie, że chcesz poznać liczbę czerwonych cukierków w torebce. Jeśli spojrzysz tylko na torebkę, możesz zauważyć, że niektóre cukierki były czerwone. Jednak nie byłoby sposobu, aby poznać dokładną liczbę. O ile łatwiej byłoby, gdyby ktoś położył cukierki na taśmie tak, aby przechodziły obok Ciebie pojedynczo? Wtedy możesz po prostu policzyć czerwone cukierki tak, jak je zobaczyłeś. W zasadzie tak działa cytometria przepływowa. Zamiast próbować znaleźć określoną grupę komórek w roztworze, w którym wszystkie są ze sobą zmieszane, przechodzą obok detektora pojedynczo.


Cel testu

Cytometria przepływowa jest stosowana w wielu obszarach badań klinicznych, ponieważ jest to stosunkowo prosty sposób wyszukiwania określonych typów komórek. Te komórki mogą być komórkami rakowymi, komórkami odpornościowymi lub nawet różnymi typami plemników. O ile istnieje sposób oznaczania komórek do wykrycia, do ich znalezienia można użyć cytometrii przepływowej. Zazwyczaj do zidentyfikowania określonego typu komórki wystarczy stworzenie przeciwciała monoklonalnego, które rozpozna tę komórkę. Następnie do przeciwciała przyczepia się barwnik fluorescencyjny, a cytometria przepływowa może wykryć wszystkie komórki, do których skierowane jest przeciwciało.

Typowe zastosowania testów cytometrii przepływowej obejmują:

  • Liczenie limfocytów T CD4 we krwi osoby zakażonej wirusem HIV. Pomaga to określić, jak zdrowy jest ich układ odpornościowy i śledzić wszelkie szkody spowodowane przez wirusa. Odbywa się to zwykle na próbce krwi.
  • Zliczanie liczby retikulocytów (niedojrzałych krwinek czerwonych) w szpiku kostnym. Można to wykorzystać do określenia przyczyny anemii. Można go również wykorzystać do sprawdzenia stanu szpiku kostnego po przeszczepie lub po chemioterapii. Odbywa się to zwykle na próbce szpiku kostnego.
  • Test zgodności histologicznej (HLA) przed przeszczepem narządu, niezależnie od tego, czy ktoś ma być dawcą, czy biorcą. Odbywa się to zwykle na próbce krwi.
  • Sprawdzanie liczby plemników w próbce nasienia. Można to zrobić w ramach badania niepłodności lub w celu sprawdzenia, czy wazektomia zakończyła się powodzeniem.
  • Diagnozowanie i klasyfikacja białaczki lub chłoniaka. Może to wymagać pobrania próbki krwi, szpiku kostnego lub innego rodzaju próbki tkanki.
  • Upewnienie się, że płytki krwi, część układu krzepnięcia, działają prawidłowo.

Twój lekarz może zlecić wykonanie testu cytometrii przepływowej z wielu powodów. Konkretne zlecone badanie będzie zależeć od tego, co chce wiedzieć lekarz. To samo dotyczy rodzaju próbki, na której zostanie uruchomiony test.


Chociaż testy cytometrii przepływowej mogą być przydatne w różnych sytuacjach, nie są doskonałe. Ponieważ testy te zliczają liczbę komórek w określonym czasie, wszystko, co zmienia te liczby, może zmienić wyniki testu. Na przykład, obecność zapalenia może zmienić liczbę określonych typów krwinek w próbce, prowadząc do fałszywie ujemnego lub fałszywie dodatniego wyniku testu w przypadku niektórych rodzajów raka. Podobnie niedawne doświadczenie seksualne może spowodować niedokładność analizy nasienia, a przyjmowanie niesteroidowego leku przeciwzapalnego (NLPZ) może wpłynąć na test czynności płytek krwi.

W zależności od powodu poddawania się cytometrii przepływowej lekarz może również zlecić inne badania. Na przykład podczas diagnozowania niektórych rodzajów raka lekarz może również chcieć wykonać badanie histochemiczne.

Ryzyka i przeciwwskazania

Ryzyko związane z cytometrią przepływową ogranicza ryzyko związane z pobieraniem próbek. Dlatego ryzyko zależy od rodzaju użytej próbki. Próbkę krwi lub nasienia można stosunkowo łatwo bezpiecznie pobrać. Natomiast próbka szpiku kostnego lub próbka tkanki jest trudniejsza i wiąże się z dodatkowym ryzykiem. Jednak testy te są nadal uważane za całkiem bezpieczne. Znaczne siniaki, krwawienia, infekcje i / lub reakcje na znieczulenie są rzadkie, ale stanowią one najbardziej prawdopodobne ryzyko aspiracji szpiku kostnego i / lub biopsji tkanki.


Ogólnie rzecz biorąc, lekarze nie zleciliby biopsji szpiku kostnego ani próbki tkanki, gdyby nie podejrzewali, że muszą przeanalizować ten typ próbki, aby zdiagnozować Twoją chorobę. W rzeczywistości czasami lekarze rozpoczynają cytometrię przepływową na próbce krwi, zanim przejdą do bardziej inwazyjnych badań. Nie ma szczególnych przeciwwskazań do cytometrii przepływowej, chociaż niektórzy ludzie mogą potrzebować zmian w protokołach pobierania próbek.

Przed testem

To, co się stanie, gdy lekarz zdecyduje, że potrzebujesz testu cytometrii przepływowej, będzie zależeć od powodu, dla którego to badanie jest potrzebne. Czasami będziesz musiał odstawić jakiś lek lub jakąś czynność na pewien czas, zanim test będzie dokładny. W takim przypadku zostaniesz poproszony o zmianę zachowania i powrót w celu pobrania próbki w późniejszym terminie. Innym razem próbkę do cytometrii przepływowej można pobrać podczas tej samej wizyty, na której lekarz zdecyduje, że badanie jest potrzebne.

Jeśli lekarz chce, abyś poddał się cytometrii przepływowej, ważne jest, aby zapytać, czy i jak jakiekolwiek leki lub suplementy mogą wpłynąć na wyniki testu. Powinieneś również zapytać, jaki rodzaj próbki zostanie pobrany i czy będziesz musiał wrócić na oddzielną wizytę. Powinieneś także powiadomić lekarza, jeśli jesteś w ciąży lub podejrzewasz, że możesz być w ciąży oraz jeśli jesteś wrażliwy lub uczulony na jakiekolwiek leki lub artykuły medyczne (takie jak lateks).

wyczucie czasu

Czas potrzebny na wykonanie testu będzie zależał od rodzaju potrzebnej próbki. Pobranie krwi powinno zająć tylko kilka minut. Nie będzie się różnić od jakiegokolwiek innego badania krwi, które otrzymasz w gabinecie lekarskim. Oczekuje się, że próbka nasienia zajmie więcej czasu. Jednak długość czasu jest bardzo indywidualna. Zależy to od tego, jak komfortowo czujesz się w biurze i jak długo potrwa dostarczenie próbki.

Testy szpiku kostnego potrwają dłużej. Jak długo będzie zależeć od tego, czy potrzebujesz tylko środka znieczulającego miejscowo, czy też sedacji dożylnej. Jeśli potrzebujesz tylko miejscowej sedacji, cały proces powinien zająć około pół godziny. Będzie 5-10 minut na przygotowanie, 10 minut na wykonanie zabiegu i 10-15 minut na regenerację. W tym momencie możesz wyjść i wrócić do swojego dnia. Jeśli zostanie zastosowana sedacja IV, prawdopodobnie będziesz w szpitalu dłużej. Daj sobie godzinę lub więcej, aby być bezpiecznym i zaplanuj, że ktoś odwiezie Cię do domu.

Jeśli potrzebujesz innego rodzaju biopsji, czas będzie zależał od konkretnego rodzaju pobieranej tkanki. Pobieranie próbki z wątroby bardzo różni się od pobierania próbki z węzła chłonnego. Dlatego warto porozmawiać z lekarzem o tym, jak ustalić swoje oczekiwania.

Lokalizacja

Badania krwi można zwykle wykonać w gabinecie lekarskim lub w dowolnym miejscu badań. Niektóre gabinety lekarskie mogą również wykonać na miejscu biopsję szpiku kostnego. Jednak testy szpiku kostnego i inne biopsje są częściej wykonywane w szpitalu lub innej klinice. Dzieje się tak, ponieważ nie wszyscy lekarze mają pod ręką znieczulenie i inne środki. Niektóre rodzaje biopsji mogą wymagać udania się na oddział chirurgiczny.

W co się ubrać

Jeśli przechodzisz badanie szpiku kostnego lub inną biopsję, powinieneś spodziewać się zmiany w fartuch do testu. W zależności od konkretnego rodzaju testu możesz lub nie być w stanie utrzymać niektórych elementów garderoby. Możesz również zostać poproszony o zdjęcie biżuterii, szczególnie jeśli potrzebne jest jakiekolwiek zdjęcie.

W przypadku pobierania krwi możesz się spodziewać, że będziesz musiał podwinąć rękaw, więc dobrze jest założyć koszulę z krótkim rękawem lub taką, która jest łatwa do podniesienia.

Jedzenie i picie

Ogólnie rzecz biorąc, przed wykonaniem cytometrii przepływowej powinieneś móc jeść i pić jak zwykle. Jednak może to nie być prawdą, jeśli musisz poddać się pewnym rodzajom sedacji. Jeśli masz badanie szpiku kostnego lub inną biopsję, skonsultuj się z lekarzem, czy możesz bezpiecznie jeść i pić po północy. Ponadto ważne jest, aby porozmawiać z lekarzem o tym, czy są jakieś leki, których będziesz musiał przerwać przed badaniem. Odpowiedź będzie się różnić w zależności od tego, jaki typ próbki jest używany i pod kątem czego jest testowany.

Ubezpieczenie kosztów i zdrowia

Cytometria przepływowa może być dość droga. Dlatego niektórzy ubezpieczyciele wymagają uprzedniej zgody przed przeprowadzeniem tych testów. Zależy to zarówno od ubezpieczyciela, jak i od wskazania do procedury. Ważne jest, aby sprawdzić wytyczne dla konkretnego ubezpieczyciela, czy wymagana jest wcześniejsza zgoda, aby badanie było objęte ubezpieczeniem.

Co przynieść

Zawsze dobrze jest zabrać ze sobą kartę ubezpieczenia zdrowotnego i dowód tożsamości ze zdjęciem, jeśli konieczne jest wykonanie zabiegu. Obejmuje to poddanie się badaniu szpiku kostnego lub biopsji tkanki. Jeśli zostaniesz poddany sedacji, może być konieczne zabranie kogoś, kto odwiezie Cię do domu. Jeśli nie masz pewności, czy zostaniesz poddany sedacji, skonsultuj się z lekarzem przed wizytą.

Podczas testu

Jeśli pobierasz próbkę krwi do cytometrii przepływowej, możesz kontaktować się tylko z flebotomistą, pielęgniarką lub technikiem. Jeśli jednak masz badanie szpiku kostnego lub biopsję, co najmniej jeden lekarz będzie obecny. Ponadto będą tam również inni członkowie zespołu. Liczba obecnych osób będzie zależeć od tego, czy potrzebujesz środków uspokajających i konkretnego rodzaju pobieranej próbki.

Aby wykonać badanie krwi, po prostu odsłonisz ramię, a technik założy opaskę uciskową, zdezynfekuje miejsce, włoży igłę, napełni jedną lub więcej probówek krwią, a następnie zabandażuje miejsce. W celu pobrania nasienia zostaniesz skierowany do prywatnego pokoju, w którym będziesz się masturbować i pobierać próbkę do sterylnego kubka.

Test wstępny

Przed badaniem szpiku kostnego lub biopsją zostaniesz poproszona o przebranie się w fartuch. Jeśli wykonujesz badanie szpiku kostnego lub biopsję w znieczuleniu miejscowym, Twoja skóra zostanie oczyszczona, a środek znieczulający zostanie wstrzyknięty w pobliżu miejsca biopsji. Jeśli stosowana jest sedacja IV, w jednym z twoich ramion zostanie rozpoczęta IV. Zostaniesz poproszony o położenie się w pozycji zapewniającej lekarzowi dobry dostęp do miejsca badania. Jeśli czujesz się nieswojo lub uważasz, że będziesz mieć trudności z pozostaniem nieruchomo w tej pozycji, poinformuj o tym lekarza. Mogą być w stanie zapewnić Ci poduszki i podpórki, które pomogą Ci pozostać na miejscu. Szczególnie w przypadku testu szpiku kostnego ważne jest, aby móc leżeć nieruchomo.

Co to jest biopsja szpiku kostnego?

Przez cały test

W przypadku badania szpiku kostnego, gdy znieczulenie lub sedacja zaczną działać, zostaniesz poproszony o położenie się bardzo spokojnie. W miejscu badania można wykonać niewielkie nacięcie (nacięcie). Następnie zostanie wprowadzona specjalna igła przez kość do szpiku kostnego. Może to być niewygodne i możesz odczuwać presję. Szpik kostny zostanie zassany do igły, co może spowodować uczucie ciągnięcia. Druga igła może zostać użyta do usunięcia stałego kawałka szpiku kostnego. Po pobraniu próbki lekarz będzie uciskał miejsce, aż krwawienie ustanie. Następnie na miejscu zostanie umieszczony bandaż. Następnie zostaniesz poproszony o leżenie nieruchomo przez 10-15 minut.

Jeśli masz biopsję w innym miejscu, procedura jest podobna. Jednak można użyć obrazowania, aby upewnić się, że igła jest we właściwym miejscu. Na przykład, jeśli próbują pobrać biopsję z guza, mogą użyć ultradźwięków, aby skierować igłę we właściwe miejsce. W pewnych okolicznościach próbka używana do cytometrii przepływowej może wymagać pobrania w znieczuleniu ogólnym. W takim przypadku będziesz spać przez całą procedurę.

Post-Test

Jeśli po badaniu poczujesz ból lub dyskomfort, możesz zostać poproszony o zażywanie leku przeciwbólowego. Twój lekarz prawdopodobnie zaleci ci skontaktowanie się z nią, jeśli po badaniu wystąpi jakakolwiek gorączka lub jakiekolwiek oznaki zapalenia lub infekcji w miejscu pobrania biopsji. Jeśli nie potrzebowałeś środka znieczulającego lub miałeś tylko znieczulenie miejscowe, powinieneś być w stanie wrócić do codziennej rutyny. Jeśli miałeś dożylną sedację lub znieczulenie ogólne, powinieneś spodziewać się spokoju przez resztę dnia.

Po teście

Otrzymanie wyników testu przez lekarza prawdopodobnie potrwa kilka dni lub dłużej. Jeśli miałeś badanie krwi, nie musisz zmieniać swojej rutyny. Po wykonaniu testu szpiku kostnego musisz unikać zamoczenia bandaża lub miejsca badania przez 24 godziny. Oznacza to zakaz kąpieli, prysznica ani pływania. Zostaniesz również poinformowany, aby nie angażować się w energiczne zajęcia przez dzień lub dwa.

Jeśli wykonałeś biopsję w innym miejscu, ostrożność będzie zależeć od konkretnego sposobu, w jaki pobrano próbkę. Możesz szybko wrócić do normalności. Może to również zająć kilka dni.

Zarządzanie efektami ubocznymi

Ważne jest, aby skontaktować się z lekarzem, jeśli po badaniu szpiku kostnego lub innej biopsji wystąpi którykolwiek z poniższych objawów:

  • Gorączka
  • Krwawienie, które nie ustaje lub przesiąka przez bandaż
  • Ból, który z czasem się pogarsza
  • Obrzęk w miejscu biopsji
  • Zaczerwienienie lub drenaż w miejscu biopsji, które z czasem pogarszają się.

Jeśli po jednej z tych procedur odczuwasz łagodny lub umiarkowany ból, powinien on być zazwyczaj opanowany za pomocą dostępnych bez recepty leków przeciwbólowych. Jeśli jednak masz jakiekolwiek problemy z krwawieniem, możesz zostać poinstruowany, aby nie używać aspiryny i niektórych innych leków. Dlatego warto skonsultować się z lekarzem, która opcja (np. Paracetamol) byłaby najlepsza.

Interpretacja wyników

Powrót wyników cytometrii przepływowej może zająć nawet kilka tygodni. Czas będzie zależał od konkretnych typów komórek, których się szuka, a także od używanego laboratorium. Cytometria przepływowa jest testem bardzo technicznym i wiele laboratoriów może mieć ograniczone możliwości przetwarzania próbek.

Konkretne wyniki będą zależały od powodu, dla którego test jest wykonywany. Informacje o niektórych typowych typach wyników testów cytometrii przepływowej znajdują się poniżej.

  • Immunofenotypowanie jest rodzajem cytometrii przepływowej stosowanej do diagnozowania białaczki lub chłoniaka Test ten jest zwykle wykonywany po wykryciu nieprawidłowych wyników w morfologii krwi lub różnicach w WBC. Dzięki immunofenotypowaniu wyniki określą, czy obecne są jakiekolwiek nieprawidłowe komórki i jakie są to typy komórek. Następnie lekarz wykorzysta te informacje w połączeniu z informacjami o twoich objawach, aby określić, czy masz białaczkę, czy chłoniaka. Te informacje mogą również pomóc w ustaleniu, jaki konkretny rodzaj choroby masz.
  • Liczba retikulocytów pokazuje, jak aktywnie szpik kostny wytwarza czerwone krwinki. Zwykle jest interpretowany w połączeniu z innymi wynikami testów, takimi jak liczba czerwonych krwinek i / lub hematokryt. Wyniki tego testu nie powinny być interpretowane samodzielnie. W zależności od okoliczności, zarówno niskie, jak i wysokie wartości mogą być dobre lub problematyczne.
  • CD4 się liczy podaj liczbę komórek CD4 w milimetrach sześciennych krwi. Normalna liczba CD4 wynosi od 500 do 1500. Jeśli liczba komórek CD4 jest poniżej 500, oznacza to, że twój układ odpornościowy może być stłumiony przez HIV lub przez przyjmowanie leków hamujących układ odpornościowy. W przypadku osób z HIV liczba CD4 może zmieniać się w czasie, nawet bez zmiany stanu zdrowia. Twój lekarz prawdopodobnie opowie Ci o wzorcach w wynikach testu, zamiast patrzeć na konkretne wyniki. W przypadku osób przyjmujących leki immunosupresyjne po przeszczepie narządu niski poziom CD4 oznacza, że ​​leki te działają.
  • Wyniki testu HLA powie, czy dawca i biorca narządu są dopasowani, a jeśli nie, to ile mają niedopasowań. Niskie liczby oznaczają, że przeszczep ma większe szanse powodzenia, a najlepsze jest parowanie bez niedopasowań.
  • Analiza nasienia Wyniki pokażą, ile plemników znajduje się w próbce, a także jak dobrze funkcjonują.

Zagryźć

W większości przypadków, jeśli do diagnozy używana jest cytometria przepływowa, zostanie ona wykonana tylko raz. Jeśli jednak cytometria przepływowa jest używana do monitorowania stanu zdrowia, może być konieczne regularne powtarzanie testu. Na przykład osobom zakażonym wirusem HIV można zalecać wykonywanie testów CD4 nawet co sześć miesięcy lub nawet częściej, w zależności od tego, jak reagują na leki.

Słowo od Verywell

W zależności od tego, dlaczego przechodzisz badanie cytometrii przepływowej, oczekiwanie na wyniki może być stresujące. Dlatego ważne jest, aby porozmawiać z lekarzem o tym, czego się spodziewać. Oznacza to pytanie nie tylko o to, jak szybko prawdopodobnie otrzymasz wyniki, ale o to, jakie dodatkowe testy mogą być potrzebne, jeśli w ogóle. Możliwe, że cytometria przepływowa może być tylko pierwszym krokiem w zrozumieniu stanu zdrowia lub ostatecznym krokiem diagnostycznym długiej diagnostyki.

Bez względu na to, dlaczego korzystasz z cytometrii przepływowej, nie bój się szukać wsparcia. Może się wydawać oczywiste, że rozmowa z kimś może być pomocna, jeśli martwisz się diagnozą raka. Ale może być równie przydatna, jeśli żyjesz z HIV, a nawet rozważasz bycie dawcą narządów. Czasami posiadanie kogoś, z kim można podzielić się swoimi zmartwieniami, jest najlepszym sposobem, aby nie przytłoczyć Twojego życia.