Zawartość
Fluorescencja in situ hybrydyzacja (FISH) to jedna z kilku technik wykorzystywanych do przeszukiwania DNA komórek pod kątem obecności lub braku określonych genów lub ich części.Wiele różnych typów raka jest powiązanych ze znanymi nieprawidłowościami genetycznymi. A pod względem genetycznym nie mówimy tylko o dziedziczności. Przez całe życie komórki mogą popełniać błędy, kiedy dzielą się i rosną. W tych komórkach mogą gromadzić się mutacje DNA, które są związane z rakiem.
Jak to działa
FISH to technika wykorzystująca sondy fluorescencyjne do wykrywania określonych genów lub części genów (sekwencji DNA). Personel laboratorium medycznego i onkolodzy używają FISH do oceny pacjentów, którzy mogą mieć raka, a czasami do monitorowania pacjenta, u którego zdiagnozowano raka i który jest leczony.
FISH można wykonać przy użyciu różnych rodzajów próbek w zależności od lokalizacji i rodzaju podejrzanego raka: komórki nowotworowe pobrane z krwi obwodowej, z biopsji szpiku kostnego lub z biopsji węzłów chłonnych oraz tkanki zatopione w parafinie utrwalonej w formalinie (dotyczy to próbka tkanki, która jest przetwarzana w laboratorium i osadzana w rodzaju wosku, dzięki czemu jest sztywniejsza, tak aby można ją było pokroić na cienkie skrawki i zamocować do oglądania pod mikroskopem).
Co oznaczają litery
„H” w FISH odnosi się do hybrydyzacji. W hybrydyzacji molekularnej jako sondy używana jest znakowana sekwencja DNA lub RNA - jeśli wolisz, zwizualizuj czerwony klocek Lego. Sonda służy do znalezienia odpowiednika klocka Lego lub sekwencji DNA w próbce biologicznej.
DNA w twoim egzemplarzu jest jak stosy klocków Lego, a większość cegieł w tych stosach nie pasuje do naszej czerwonej sondy. Wszystkie twoje cegły są starannie ułożone w 23 pary stosów cegieł - każdy stos jest mniej więcej jednym z twoich sparowanych homologicznych chromosomów. W przeciwieństwie do klocków Lego, nasza czerwona sonda Lego jest jak silny magnes i znajduje swoje odpowiedniki bez konieczności sortowania stosów.
„F” odnosi się do fluorescencji. Nasza czerwona sonda może zgubić się w stosach cegieł, więc jest oznaczona kolorowym barwnikiem fluorescencyjnym, dzięki czemu będzie świecić. Kiedy znajdzie swój odpowiednik wśród 23 sparowanych stosów, fluorescencyjny znacznik ujawnia jego lokalizację. Więc teraz możesz zobaczyć, jak badacze i klinicyści mogą używać FISH do pomocy w identyfikacji, gdzie (który stos lub który chromosom) znajduje się określony gen dla danej osoby.
„Ja” i „S” oznaczają in situ. Odnosi się to do faktu, że nasz czerwony klocek Lego szuka swojego odpowiednika w podanej próbce.
RYBY i specyficzne nowotwory krwi
RYBY i inne in situ Procedury hybrydyzacji służą do diagnozowania różnorodnych anomalii chromosomowych - zmian w materiale genetycznym, zmian w chromosomach, w tym:
- Delecja: część chromosomu zniknęła
- Translokacja: część jednego chromosomu odrywa się i przykleja do innego chromosomu
- Odwrócenie: część chromosomu odrywa się i ponownie wstawia, ale w odwrotnej kolejności
- Duplikacja: część chromosomu występuje w zbyt wielu kopiach w komórce
Każdy rodzaj raka może mieć własny zestaw zmian chromosomalnych i odpowiednich sond. FISH nie tylko pomaga zidentyfikować początkowe zmiany genetyczne w procesie chorobowym, takim jak rak, ale może również służyć do monitorowania odpowiedzi na terapię i remisji choroby.
Zmiany genetyczne wykryte przez FISH czasami dostarczają dodatkowych informacji o prawdopodobnym zachowaniu się raka u danej osoby, na podstawie tego, co zaobserwowano w przeszłości u osób z tym samym typem raka i podobnymi zmianami genetycznymi. Czasami FISH jest używany po postawieniu diagnozy, aby zebrać dodatkowe informacje, które mogą pomóc w przewidywaniu wyniku pacjenta lub najlepszego leczenia.
FISH może zidentyfikować nieprawidłowości chromosomalne w białaczkach, w tym w przewlekłej białaczce limfocytowej (CLL) .W przypadku przewlekłej białaczki limfocytowej / chłoniaka z małych limfocytów FISH pozwala pacjentom określić ich kategorię prognostyczną: dobra, pośrednia lub słaba. W ostrej białaczce limfoblastycznej (ALL) genetyka komórek białaczkowych może powiedzieć o poziomie ryzyka raka i pomóc w podejmowaniu decyzji terapeutycznych.
Dostępne są również panele FISH dotyczące chłoniaka, szpiczaka mnogiego, zaburzeń proliferacji komórek plazmatycznych i zespołu mielodysplastycznego. Na przykład w przypadku chłoniaka z komórek płaszcza translokacja że FISH może wykryć zwany GH / CCND1 t (11; 14), który jest często związany z tym chłoniakiem.
Dlaczego RYBY?
Zaletą FISH jest to, że nie trzeba go wykonywać na komórkach, które aktywnie się dzielą. Badanie cytogenetyczne trwa zwykle około trzech tygodni, ponieważ komórki rakowe muszą rosnąć w naczyniach laboratoryjnych przez około 2 tygodnie, zanim będzie można je przetestować. Natomiast wyniki FISH są zwykle dostępne w laboratorium w ciągu kilku dni.